Hoe seriële verdunningen uit te voeren

Inhoud

• stadia
• Methode 1 Voer een eenvoudige verdunning uit
• Methode 2 Bereken de uiteindelijke verdunningsfactor en concentratie

In de chemie bestaat een verdunning uit het verminderen van de concentratie van een gegeven oplossing. Een seriële verdunning is eenvoudig een herhaalde verdunning van een originele oplossing om de verdunningsfactor snel te versterken. Dit type verdunning wordt vaak uitgevoerd tijdens experimenten die sterk verdunde oplossingen en hoge nauwkeurigheid vereisen, zoals die waarbij concentratiekrommen op een log-schaal betrokken zijn of die waarmee de dichtheid van bacteriën in bepaalde media kan worden berekend. Ze worden heel vaak uitgevoerd in de biochemie, microbiologie, farmacologie of chemie.

stadia

Methode 1 Voer een eenvoudige verdunning uit

1. 
   

   
   Bepaal de juiste verdunnende vloeistof (of verdunner). De keuze van het verdunningsmiddel is erg belangrijk en hangt af van de oplossing die u wilt verdunnen. Het verdunningsmiddel is vaak gedestilleerd water, maar het is niet systematisch. Dus met een oplossing die bacteriën of cellen bevat, wordt in plaats daarvan een kweekmedium gebruikt. Voor seriële verdunning wordt hetzelfde verdunningsmiddel in alle buizen gebruikt.
   • Als u niet zeker weet welk verdunningsmiddel u moet gebruiken, vraag dan hulp aan een competent persoon of zoek op internet naar wat mensen moeten doen voor een vergelijkbare ervaring.

2. 
   

   
   Maak verschillende reageerbuisjes met 9 ml verdunningsvloeistof. Deze reageerbuizen worden gebruikt om opeenvolgende verdunningen te maken. Het principe is eenvoudig, u neemt een monster van de startoplossing en brengt het over naar de volgende buis, neemt vervolgens een monster van deze buis om het in de volgende te plaatsen, enz.
   • Voordat u met de verdunningen begint, is het raadzaam om de reageerbuizen van tevoren te identificeren om later verwarring te voorkomen.
   • In elke buis heb je een concentratie die tien lager is dan in de vorige. De eerste buis bevat een verdunde oplossing in de tiende, tweede, honderdste, derde, duizendste, enzovoort. Bepaal vooraf het aantal verdunningen om te voorkomen dat er meer buizen worden gemaakt dan nodig is en onnodig verdunningsmiddel wordt verspild.

3. 
   

   
   
   
   Maak een reageerbuis met je moederoplossing. Doe minstens 2 ml. De minimale hoeveelheid stockoplossing voor seriële verdunning is één milliliter. Laat 2 ml toe voor een mogelijke tweede verdunning. Met deze tube moederoplossing kun je het een "SM" markeren.
   • Meng de startoplossing goed voordat u met een seriële verdunning begint.

4. 
   

   
   Maak de eerste verdunning. Pipetteer 1 ml van de stockoplossing in de reageerbuis met het label "SM" en breng deze hoeveelheid over in het geëtiketteerde reageerbuisje. 1/10 die al 9 ml verdunningsvloeistof bevat. Meng om een ​​homogene oplossing te verkrijgen. In deze buis zit nu 10 ml oplossing: 1 ml stockoplossing en 9 ml verdunningsvloeistof. Deze nieuwe oplossing is tien keer minder geconcentreerd dan de vorige.

5. 
   

   
   
   
   Voer de tweede verdunning uit. In de tweede seriële verdunning trekt u 1 ml van de gelabelde buisoplossing 1/10 en je zal het in de buis gieten 1/100 die al 9 ml verdunningsvloeistof bevat. De buis 1/10 zal goed gemengd zijn vóór het nemen van monsters. Nadat de overdracht is voltooid, meng je de buis goed 1/100. De oplossing uit de gemarkeerde buis 1/10 is 10 keer meer geconcentreerd dan die van de gelabelde buis 1/100.

6. 
   

   
   Herhaal deze manipulatie indien nodig. Deze procedure kan zo vaak als gewenst worden herhaald totdat de gewenste verdunning is bereikt. Voor een experiment met concentratiekrommen kunt u dus een reeks oplossingen verkrijgen met verdunningen voor de eenheid, de tiende (1/10), de honderdste (1/100) of de duizendste (1/1000).

Methode 2 Bereken de uiteindelijke verdunningsfactor en concentratie

1. 
   

   
   Bereken de verhouding de laatste verdunning na seriële verdunning. De totale verdunningsverhouding wordt verkregen door de verdunningsfactor met zichzelf zo vaak te vermenigvuldigen als er verdunningen zijn. Wiskundig is de formule als volgt: D_t = D₁ x D₂ x D₃ x ... x D_nmet D_t die de totale verdunningsfactor vertegenwoordigt en D_nde verhouding van de verdunning.
   • Laten we dus aannemen dat u 4 keer achter elkaar een 1/10 verdunning van een vloeistof uitvoert. Vervang in de formule de verdunningsfactor door zijn waarde: D_t = 10 x 10 x 10 x 10 = 10.000
   • De uiteindelijke verdunningsfactor van de vierde buis in uw seriële verdunning is 1/10 000. De concentratie van de oplossing van de laatste buis is nu 10 000 keer lager dan die van de oorspronkelijke oplossing.

2. 
   

   
   Bepaal de concentratie van een oplossing na verdunning. Om de uiteindelijke concentratie van een oplossing na seriële verdunning te vinden, moet u de startconcentratie kennen. De formule is dan: C_finale = C_eerste/ Amet C_finale die de eindconcentratie van de verdunde oplossing vertegenwoordigt, C_eerste, de concentratie van de stockoplossing en Dde vooraf bepaalde verhouding van de verdunning.
   • Dus als u een celoplossing verdunt met een concentratie van 1.000.000 cellen per ml en uw verdunningsverhouding is ingesteld op 1.000, wat is dan de uiteindelijke concentratie van uw verdunde monster?
   • Gebruik de formule:
     • C_finale = C_eerste/ A
     • C_finale = 1 000 000/1 000
     • C_finale = 1000 cellen / ml

3. 
   

   
   Let op de gebruikte eenheden. Controleer bij het uitvoeren van uw berekeningen altijd of u dezelfde eenheden gebruikt. Dus als u begint met een concentratie van cellen per ml, wordt uw uiteindelijke resultaat ook in cellen per ml. Als uw startconcentratie in delen per miljoen (ppm) is, zal uw uiteindelijke concentratie in delen per miljoen zijn.